时间:2024-10-21 来源:网络 人气:
在生物技术领域,蛋白质表达系统的选择对于获得高质量、高活性的重组蛋白至关重要。Bac-to-Bac杆状病毒表达系统作为一种高效的真核表达平台,因其独特的优势在生物药物研发、疫苗制备以及基础研究中得到了广泛应用。
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统利用杆状病毒(Baculovirus)作为外源基因的载体,通过感染昆虫细胞来实现外源蛋白的表达。该系统主要包括以下几个步骤:
构建含有目的基因的重组质粒。
将重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,制备P1代杆状病毒。
将P1代杆状病毒转染昆虫细胞,制备P2代病毒。
通过病毒扩增和纯化,获得高滴度的重组杆状病毒。
将重组杆状病毒转染昆虫细胞,实现外源蛋白的表达。
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统具有以下优势:
安全性高:杆状病毒仅感染昆虫细胞,不会感染哺乳动物或其他生物类群,降低了生物安全风险。
表达水平高:昆虫细胞能够高效表达外源蛋白,产量高。
翻译后修饰完整:昆虫细胞能够进行糖基化、磷酸化等翻译后修饰,保证表达蛋白的生物活性。
易于大规模生产:昆虫细胞可进行悬浮培养,实现大规模低成本生产。
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在以下领域得到了广泛应用:
生物药物研发:用于生产重组蛋白药物,如抗体、疫苗等。
疫苗制备:用于制备病毒疫苗、细菌疫苗等。
基础研究:用于研究蛋白质的结构和功能,以及蛋白质之间的相互作用。
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统作为一种高效的真核蛋白表达平台,具有安全性高、表达水平高、翻译后修饰完整、易于大规模生产等优势,在生物技术领域具有广泛的应用前景。